ساخت وکتور ریپورتر القایی لوسیفراز برای ردیابی فعالیت ویروس htlv-۱
نویسندگان
چکیده
زمینه و هدف: ویروس htlv-1 ((human t_cell lymphotropic virus type با حدود 20 میلیون نفر آلوده در جهان یک مشکل بهداشت جهانی است که در مناطقی مثل ژاپن و خراسان ایران اندمیک است. این ویروس عامل بیماری پیشرونده لوسمی سلول های t بزرگسالان (atl) می باشد که دارویی تائید شده موثر بر علیه آن تاکنون وجود ندارد. به دلیل خصوصیات غیر سیتولیتیکی و انتقال سلول به سلول این ویروس، مطالعات دارویی در کشت سلولی بر روی این ویروس با روش های معمول در آزمایشگاه in vitro )) کم بوده و منحصر به چند رده سلولی آلوده به آن می باشد .بنابراین ساخت وکتور ریپورتر برای ارزیابی عفونت ویروس htlv1 در کشت سلولی به جهت مطالعات دارویی ضروری به نظر می رسد. ریپورتر های ساخته شده برای رتروویروس ها معمولاً بر اساس ترانس اکتیویشن ناحیه ltr می باشد. ناحیه ltr در ژنوم ویروس شامل پروموترویروس است که در تکثیرو نسخه برداری آن، تحت تاثیر پروتئین ویروسی tax نقش دارد. روش کار: منطقه پروموتری ltr ویروس با استفاده از آنزیم محدود کننده از پلاسمید pucltr-lacz بریده و در وکتور بدون پروموتر pgl4.17 که حامل ژن ریپورتر لوسیفراز است در بالادست ژن لوسیفرازساب کلون شد. ابتدا کلونینگ با colony pcr، هضم آنزیمی وتعیین توالی تایید شد. سپس سلول t293 باوکتور نوترکیب ترانسفکت شد وبیان القایی لوسیفراز مورد تایید قرار گرفت. یافته ها: وکتور نوترکیب تولید شده درسلول t293 پس از کوترانسفکت با وکتور بیانیtax باعث بیان قابل ملاحظه ی لوسیفراز تا 50 برابر درسلول های مورد آزمایش نسبت به کنترل شد. نتیجه گیری: با توجه به قابلیت بالای وکتور نوترکیب تولید شده، می تواند درمطالعات بعدی درساخت رده سلولی نشانگر برای ویروس htlv-1، به جهت مطالعات پایه ای و دارویی به کار رود.
منابع مشابه
ساخت وکتور ریپورتر القایی لوسیفراز برای ردیابی فعالیت ویروس HTLV-1
Background: HTLV-1 (Human T_cell lymphotropic virus type), with about 20 million individuals infected worldwide, is a global health problem and is endemic in certain area such as Japan and Khorasan province of Iran. HTLV-1 is the causative agent of progressive diseases, Adult T cell Leukemia (ATL), and HTLV-I Associated Myelopathy/Tropical Spastic Paraparesis (HAM/TSP) which have no ...
متن کاملطراحی، ساخت و بیان وکتور نوترکیب ژن نوکلئوپروتیین ویروس هاری
Background: Rabies is an acute encephalitis that causes more than 60,000 deaths worldwide. The only way to save individuals bitten by a rabies-infected animal is the timely use of effective vaccines. Treatment with new generation vaccines is expensive. Therefore, there is a global movement towards the production of less expensive vaccines which retain and improve upon the quality and effectiven...
متن کاملطراحی و ساخت وکتور نوترکیب واجد ژن Vpr ویروس نقص ایمنی اکتسابی انسانی (HIV) با استفاده از وکتور EGFP-N1
Background and purpose: The purpose of this study was to design a recombinant vector pEFGP- N1 containing the full length of HIV-1Vpr gene. To the best of our knowledge, the cloning of Vpr gene in pEGFP_N1 is not previously done. Materials and methods: As a source of Vpr gene the pUC19-Vpr recombinant vector was confirmed by digestion with restriction enzymes BglII and NotI in order to separ...
متن کاملطراحی، ساخت و بیان وکتور نوترکیب ژن نوکلئوپروتیین ویروس هاری
زمینه و هدف: هاری (rabies) یک آنسفالیت حاد است که سالانه سبب مرگ بیش از 60.000 انسان در جهان می شود. تنها راه نجات بیماران استفاده ی به موقع از واکسن های کارآمد است. هدف از این مطالعه معرفی یک سیستم بیانی یوکاریوتی جدید به منظور بیان ژن نوکلئوپروتیین (n) ویروس هاری می باشد. این سیستم جهت ارزیابی و ساخت واکسن ضد هاری به کار می رود. روش بررسی: توالی کامل ژن n سویه pv ویروس هاری به روش reverse tra...
متن کاملشیوع عفونت ویروس لنفوتروپیک سلول تی انسانی نوع ۱ (htlv؛-۱) در ایران؛ یک مطالعه مروری
زمینه: عفونت ویروس لنفوتروپیک سلول تی انسانی نوع1 (human t-cell lymphotropic virus type 1 یا 1-htlv) در جمعیت عمومی شمال شرق ایران به طور بومی (endemic)وجود دارد و شیوع قابل توجه آن در سایر نقاط کشور گزارش شده است. در این مقاله مروری نتایج مطالعات مربوط به شیوع سرمی عفونت 1-htlv در جمعیت عمومی، اهداکنندگان خون و دریافت کنندگان مکرر خون در مناطق مختلف کشور که تاکنون در منابع داخلی و خارجی منتشر ...
متن کاملطراحی و ساخت وکتور نوترکیب واجد ژن vpr ویروس نقص ایمنی اکتسابی انسانی (hiv) با استفاده از وکتور egfp-n۱
سابقه و هدف: در این پروژه، هدف کلی تحقیق طراحی و ساخت وکتور نوترکیب واجد ژن تمام طول vpr ویروس نقص ایمنی اکتسابی انسانی (hiv-1) با استفاده از وکتور pegfp-n1 بود. کلونینگ ژن vpr قبلاً درون وکتور pegfp_n1 صورت نگرفته بود. مواد و روش ها: وکتور puc19 دارای ژن تمام طول vpr جهت تایید با استفاده از آنزیم های محدود کننده برش داده شد. سپس جهت اضافه کردن سایت های برش آنزیمی (xhoi, kpni) در ژن مورد نظر مطا...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
مجله علوم پزشکی رازیجلد ۲۰، شماره ۱۱۳، صفحات ۶۰-۶۷
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023